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        1. NRPB42L Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

          发布日期:2020-10-27 阅读次数:1866

          品  名:Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

          英文名:Strep-Tactin NUPharose Fast Flow, Strep-Tactin NUPharose FF

          目录号:NRPB42L .NRPB42S(预装柱)

          规  格:20 ml100 ml1L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

          运  输:2 ~ 25℃常压 .避光

          贮  存:20%乙醇2 ~ 8℃

          保质期:3.


          相关介绍: 

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF是1种将Strep-Tactin键合于琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质主要用于纯化Strep II标签蛋白.Strep II标签为8个氨基酸的"昵(WSHPQFEK)由于标签.仅为1 kDa左右1般不影响融合后蛋白质的结构和功能常用于融合表达蛋白质的检测和纯化.


          本产品的配基Strep-Tactin是链霉亲和素(Streptavidin)的突变体与链霉亲和素相比Strep-Tactin对Strep II标签的亲和能力至少强10倍以上能够于温和的条件下与Strep II融合蛋白结合和解离.由于Strep-Tacin对Strep II标签具有高度特异性1般1步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品.


          Strep II标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱该洗脱方式比较温和1般不会影响蛋白质的性质.如Strep II标签蛋白质能耐受碱性条件也可用碱液洗脱比如10 mM NaOH等.

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF能耐受较高的碱性条件可以用0.5 M NaOH进行再生清洗和去除热源等.


          另外2-(4-羟基苯唑)苯甲酸(HABA)也可用于凝胶再生过量的HABA能以竞争的方式替换脱硫生物素但于无HABA的缓冲液中 Strep-Tactin与HABA会发生解离从而使HABA脱落实现再生.


          技术指标:

          基质

          4%琼脂糖凝胶微球

          配基

          Strep-Tactin

          配基密度

          ≥5 mg/ml

          填料粒径

          60 ~ 180 μm

          好的流速

          800 cm/h

          推荐流速

          20 ~ 100 cm/h

          pH稳定性

          短时间pH 2 ~ 13;长时间pH 4 ~ 11

          耐反压

          0.3 MPa

          载量

          ≥6 mg/ml Strep II标签蛋白


          使用方法:

          1 推荐缓冲液

          纯化Strep II标签蛋白

          结合缓冲液:100 mM Tris-HCl150 mM NaCl1 mM EDTApH 8.0;

                 或20 mM NaH2PO4280 mM NaCl6 mM KClpH 7.4


          洗脱缓冲液:结合缓冲液 + 2.5 mM 脱硫生物素;

                 或10 mM NaOH


          再生缓冲液:0.5 M NaOH;

                 或结合缓冲液+1 mM HABA


          2 样品准备

          上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液1致.通常可用透析 .超滤 .稀释等方法处理样品.并且上柱前应过0.45 μm4せ蚋咚倮胄娜コ不溶物.


          3 样品纯化

          3.1 平衡:取适量的Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF装入合适的层析柱中用蒸馏水清洗5个柱体积去除保存液再用结合缓冲液平衡5个柱体积建议流速为100 cm/h.

          3.2 上样:将准备好的样品上柱建议流速为20 ~ 100 cm/h可根据实际结合情况选择流速能获得较好的效果.

          3.3 再平衡:上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上或平衡至基线洗去杂质推荐流速为100 cm/h.

          3.4 洗脱:用洗脱缓冲液洗10 ~ 20个柱体积建议流速为100 cm/h收集的洗脱液应立即调节pH至稳定范围并根据需要置换缓冲液.

          3.5 NaOH再生:洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3 ~ 5个柱体积并用0.5 M NaOH再生3 ~ 5个柱体积再用蒸馏水清洗至中性用20%乙醇保存柱子或进行下1次纯化.

          3.6 HABA再生:用脱硫生物素洗脱目的蛋白的还可以用HABA缓冲液再生1般用HABA的结合缓冲液洗15个柱体积再用结合缓冲液洗30个柱体积然后可以用20%乙醇保存柱子或进行下1步纯化.HABA上柱后凝胶颜色会变为红橙色于结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色这种再生方式1般使用体积会大些.

          导购指南

          中文名

          英文简称

          货号

          规格

          产品描述

          重力预装柱

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF重力预装柱

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF pre-packed column

          NRPB42S-Z11

          1*1mL

          1支*1ml

          NRPB42S-Z41

          4*1mL

          4支*1ml

          NRPB42S-Z15

          1*5mL

          1*5mL

          NRPB42S-Z25

          2*5mL

          2支*5mL

          AKTA中压预装柱

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF中压预装柱

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF pre-packed column

          NRPB42S-Y11

          1*1mL

          1支*1ml

          NRPB42S-Y41

          4*1mL

          4支*1ml

          NRPB42S-Y15

          1*5mL

          1*5mL

          NRPB42S-Y25

          2*5mL

          2支*5mL

          填料

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

          Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF

          NRPB42L-10

          10mL

          1瓶*10ml

          NRPB42L-20

          20mL

          1瓶*20ml

          NRPB42L-100

          100mL

          1瓶*100ml

          NRPB42L-500

          500ml

          1瓶*500ml

          注:欧洲杯竞猜生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


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