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          1. NRPB52L 重组蛋白L琼脂糖凝胶FF

            发布日期:2020-10-27 阅读次数:1346

            品  名:重组蛋白L琼脂糖凝胶FF

            英文名:Recombinant Protein L NUPharose Fast Flow, rProtein L NUPharose FF

            目录号:NRPB52L .NRPB52S(预装柱)

            规  格:20 ml100 ml1L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

            运  输:2 ~ 25℃常压 .避光

            贮  存:20%乙醇2-8℃

            保质期:3.


            相关介绍:

            重组蛋白L琼脂糖凝胶FF是将重组大消化链球菌蛋白L(Recombinant Peptostreptococcus magnus Protein L简称r-PPL)偶联于高度交联的琼脂糖凝胶上的1种亲和纯化介质.大消化链球菌蛋白L(PPL)能与抗体的κ轻链结合而不会影响抗体的抗原结合位点这1特性使其与结合抗体Fc区域的蛋白A .蛋白G相比能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体.如人类的IgG .IgM .IgA .IgE .IgD以及含κ轻链(人类1 .3 .4型小鼠1型)的Fab .scFv等抗体片段.但不能与重链 .λ轻链 .κ轻链(2型)结合所以重组蛋白L琼脂糖凝胶FF不能纯化牛 .山羊 .绵羊 .鸡来源的抗体.


            技术指标:

            基质

            4%高度交联琼脂糖凝胶

            配基

            重组蛋白L

            配基密度

            6 mg/ml

            填料粒径

            60~180 μm

            好的流速

            800 cm/h

            推荐流速

            20-100 cm/h

            工作(清洗)pH

            2~9(2~10)

            0.3 MPa

            载量

            40 mg/ml human IgG


            抗体与蛋白A .蛋白G的结合力:

            种类

            Species

            亚型

            Antibody Class

            蛋白A

            Protein A

            蛋白G

            Protein G

            蛋白L

            Protein L

            Human

            IgG1

            IgG2

            IgG3

            IgG4

            IgM

            IgD

            IgA

            Fab

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            +

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            小鼠

            Mouse

            IgG1

            IgG2a

            IgG2b

            IgG3

            IgM

            +

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            大鼠

            Rat

            IgG1

            IgG2a

            IgG2b

            IgG2c

            +

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            +++

            +++

            Cow

            IgG1

            IgG2

            +

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            -

            -

            山羊

            Goat

            IgG1

            IgG2

            +

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            +++

            +++

            -

            -

            Horse

            IgG(ab)

            IgG(c)

            IgG(T)

            +

            +

            -

            -

            -

            +++

            NA

            NA

            NA

            Rabbit

            IgG

            +++

            +++

            +

            Pig

            IgG

            +++

            +

            +++

            Dog

            IgG

            +++

            +

            NA

            Chicken

            IgY

            -

            -

            -

            注:-表示不结合;+表示微弱结合;++表示中等结合;+++表示很强结合;NA表示暂无数据.能用于亲和纯化的抗体1般需要中等以上的结合力.


            应用举例:

            结合缓冲液:20 mM磷酸盐缓冲液(PB)pH 7.4

            洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 2.7

            中和缓冲液:1 M Tris-HClpH 9.0

            1)1 ml重组蛋白L琼脂糖凝胶FF预装柱用5~10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液;

            2)用结合缓冲液平衡 5~10个柱床体积;

            3)将3 ml小鼠腹水用结合缓冲液稀释至15 ml0.45 μm4す滤上样;

            4)用结合缓冲液平衡 5~10个柱床体积至基线;

            5)用洗脱缓冲液洗脱抗体收集洗脱峰并用中和缓冲液调节其pH至中性;

            6)每次使用后再用3~5个柱床体积的洗脱缓冲液再生清洗;

            7)SDS-PAGE(图1)电泳分析洗脱下来的小鼠单抗纯度于95%以上.



            注意事项:

            1)预填柱使用简易方便于没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务.

            2)样品洗脱后1般pH很低应立即用碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HClpH 9.0) 将收集到的抗体溶液中和到中性或于收集容器中事先装5%~20% .pH 7-9的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液)以利于维持抗体的生物活性避免抗体失活.

            3)使用时保证柱子和缓冲液的温度1致避免柱床内产生气泡影响纯化效果如果已经产生气泡可以自行重装柱子.

            4)通常目标样品洗脱后应继续用0.1 M柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH 2.0~2.7)洗3~5个柱体积然后用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上作简易再生.

            5)使用数次后应进行于位清洗建议用0.1% Triton X-100 37℃洗1-3个柱体积(10~30min)立即用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上;或70%乙醇洗5个柱体积以上(可保持4~16h)再用平衡缓冲液清洗5柱体积以上;或10mM NaOH洗1-3个柱体积(10-20min)再用平衡缓冲液清洗5柱体积以上.于位清洗能去除强疏水性蛋白质和脂类恢复柱子的载量和流速.


            导购指南

            中文名

            英文简称

            货号

            规格

            产品描述

            重力预装柱

            重组蛋白L琼脂糖凝胶FF重力预装柱

            ProL NUPharose FF pre-packed column

            NRPB52S-Z11

            1*1mL

            1支*1ml

            NRPB52S-Z41

            4*1mL

            4支*1ml

            NRPB52S-Z15

            1*5mL

            1*5mL

            NRPB52S-Z25

            2*5mL

            2支*5mL

            AKTA中压预装柱

            重组蛋白L琼脂糖凝胶FF中压预装柱

            ProL NUPharose FF pre-packed column

            NRPB52S-Y11

            1*1mL

            1支*1ml

            NRPB52S-Y41

            4*1mL

            4支*1ml

            NRPB52S-Y15

            1*5mL

            1*5mL

            NRPB52S-Y25

            2*5mL

            2支*5mL

            填料

            重组蛋白L琼脂糖凝胶FF

            ProL NUPharose FF

            NRPB52L-10

            10mL

            1瓶*10ml

            NRPB52L-20

            20mL

            1瓶*20ml

            NRPB52L-100

            100mL

            1瓶*100ml

            NRPB52L-500

            500ml

            1瓶*500ml

            注:欧洲杯竞猜生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积




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