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      1. NRPB19 重组牛肠激酶(组氨酸标签)(rbEK-His)

        发布日期:2020-10-26 阅读次数:890

        品    名:重组牛肠激酶(组氨酸标签)(Recombinant Bovine Enterokinase, His-tag, rbEK-His)

        目 录 号:NRPA19S/L

        规    格:200 U(液体)1000 U(液体)100 μg1 mg特殊订制

        产品形式:液体为1 U/μl rbEK-His, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;冻干粉冻干前为50 mM Tris-HCl (pH 8.0)酶溶液

        分 子 量:27.6 kDa(SDS-PAGE检测约为30 kDa)

        等 电 点:5.72

        比 活 性:≥40000 U/mg即1 mg rbEK-His至少切割2000 mg融合蛋白.

        纯    度:≥95%(SDS-PAGE检测)

        A280nm(1 mg/mL):1.95

        内 毒 素:≤5 EU/mg

        来    源:大肠杆菌

        保存条件:-20℃保存

        有 效 期:3.

        活性定义:25℃反应缓冲液为50 mM Tris-HCl (pH 8.0)底物为50 μg 1 mg/ml含酶切位点的融合蛋白16 h内切割95%的融合蛋白所需的酶量为1个酶活力单位(1 U).


        相关介绍:

        肠激酶(EC 3.4.21.9)是1种丝氨酸蛋白水解酶能高效专1地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列并于赖氨酸(LysK)的C端水解肽键产生切割于生物体内水解胰蛋白酶原转变为胰蛋白酶由于肠激酶具有高度专1性和高效酶切特性广泛应用于基因工程产品的开发.


        天然肠激酶由1条115 kDa的重链和1条35 kDa的轻链组成重链起锚定细胞膜的作用轻链具有全酶完整的催化活性.本产品为牛肠激酶的轻链活性核心区域与组氨酸标签的融合蛋白采用大肠杆菌分泌技术表达与天然肠激酶相比比活性更高.同时带有组氨酸标签酶切后可用镍柱(NRPB07)去除样品中的rbEK-His特别适用于基因工程融合蛋白的酶切.


        注意事项:

        1)1些试剂会影响酶的活性如 >2 M Urea>250 mM NaCl>20 mM β-ME>0.1% SDS>50 mM Imidazole样品中如果含有这些成分需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0);

        2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系;

        3)溶解后放置于冰浴上并尽量马上使用;

        4)若1次性用不完请于使用前配制成母液并分装成小规格(保证1次试验的用量)保存于-65℃避免反复冻融影响蛋白活性

        5)避免使用强酸 .强碱 .强氧化剂 .高浓度的有机溶剂等易引起蛋白质变性的试剂;

        6)本产品仅限于科研使用.


        图片27.jpg

        M:蛋白质分子量标准

        Lane 1:rbEK-His


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