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    1. NRPB02L 重组蛋白G琼脂糖凝胶FF

      发布日期:2020-10-27 阅读次数:2027

      品  名:重组蛋白G 琼脂糖凝胶FF

      英文名:Recombinant Protein G NUPharose Fast Flow, rProtein G NUPharose FF

      目录号:NRPB02L .NRPB02S(预装柱)

      规  格:20 ml100 ml1 L1 ml预装柱5 ml预装柱特殊规格订制

      运  输:2 ~ 25℃常压 .避光

      贮  存:20%乙醇2 ~ 8℃

      保质期:3.


      相关介绍:

      链球菌G蛋白(Streptococcus Protein G 简称SPG)是G .C型链球菌细胞壁中的1种蛋白质能特异性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合而不影响其Fab段与抗原分子结合的能力其亲和填料可以用于从血清 .腹水 .组织培养物等上清中结合吸附并纯化免疫球蛋白(抗体).


      技术指标:

      基质

      4%高度交联琼脂糖凝胶

      配基

      重组蛋白G

      配基密度

      ≥6 mg/ml

      填料粒径

      60 ~ 180 μm

      好的流速

      800 cm/h

      推荐流速

      20 ~ 100 cm/h

      工作(清洗)pH

      2 ~ 9(2 ~ 10)

      耐反压

      0.3 MPa

      载量

      ≥40 mg/ml IgG


      抗体与蛋白A .蛋白G的结合力:

      种类

      Species

      亚型

      Antibody Class

      蛋白A

      Protein A

      蛋白G

      Protein G

      Human

      IgG1

      IgG2

      IgG3

      IgG4

      IgM

      IgD

      IgA

      Fab

      +++

      +++

      +

      +++

      +

      -

      +

      +

      +++

      +++

      +++

      +++

      -

      -

      -

      +

      小鼠

      Mouse

      IgG1

      IgG2a

      IgG2b

      IgG3

      IgM

      +

      +++

      +++

      +++

      -

      ++

      +++

      +++

      +++

      -

      大鼠

      Rat

      IgG1

      IgG2a

      IgG2b

      IgG2c

      +

      -

      -

      +++

      ++

      +++

      +

      +++

      Cow

      IgG1

      IgG2

      +

      +++

      +++

      +++

      山羊

      Goat

      IgG1

      IgG2

      +

      +++

      +++

      +++

      Horse

      IgG(ab)

      IgG(c)

      IgG(T)

      +

      +

      -

      -

      -

      +++

      Rabbit

      IgG

      +++

      +++

      Pig

      IgG

      +++

      +

      Dog

      IgG

      +++

      +

      Chicken

      IgY

      -

      -


      注:-表示不结合;+表示微弱结合;++表示中等结合;+++表示很强结合.


      应用举例:

      结合缓冲液:20 mM磷酸盐缓冲液(PB)pH 7.4

      洗脱缓冲液:0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液pH 2.7

      中和缓冲液:1 M Tris-HClpH 9.0

      1)1 ml重组蛋白G琼脂糖凝胶预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液;

      2)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积;

      3)将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释至50 ml0.45 μm4す滤上样;

      4)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积至基线;

      5)用洗脱缓冲液洗脱抗体收集洗脱峰并用中和缓冲液调节其pH至中性;

      6)每次使用后再用3 ~ 5个柱床体积的洗脱缓冲液再生清洗;

      7)SDS-PAGE(图1)电泳分析洗脱下来的兔多抗纯度于95%以上.


      图片29.jpg图片30.jpg

      图 1


      注意事项:

      1)预填柱使用简易方便于没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务.

      2)样品洗脱后1般pH很低应立即用碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HClpH 9.0) 将收集到的抗体溶液中和到中性或于收集容器中事先装5% ~ 20% .pH 7 ~ 9的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液)以利于维持抗体的生物活性避免抗体失活.

      3)使用时保证柱子和缓冲液的温度1致避免柱床内产生气泡影响纯化效果如果已经产生气泡可以自行重装柱子.

      4)通常目标样品洗脱后应继续用0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液(pH 2.0 ~ 2.7)洗3 ~ 5个柱体积然后用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上作简易再生.

      5)使用数次后应进行于位清洗建议用0.1% Triton X-100 37℃洗1 ~ 3个柱体积(10 ~ 30 min)立即用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上;或70%乙醇洗5个柱体积以上(可保持4 ~ 6 h)再用平衡缓冲液清洗5柱体积以上.于位清洗能去除强疏水性蛋白质和脂类恢复柱子的载量和流速.

      6)

      推荐流速

      预装柱体积ml

      1 ml

      5 ml

      10 ml

      流速(ml /min )

      0.2

      1

      2

      导购指南


      中文名

      英文简称

      货号

      规格

      产品描述

      重力预装柱

      重组蛋白G琼脂糖凝胶FF重力预装柱

      ProG NUPharose FF pre-packed columnn

      NRPB02S-Z11

      1*1mL

      1支*1ml

      NRPB02S-Z41

      4*1mL

      4支*1ml

      NRPB02S-Z15

      1*5mL

      1*5mL

      NRPB02S-Z25

      2*5mL

      2支*5mL

      AKTA中压预装柱

      重组蛋白G琼脂糖凝胶FF中压预装柱

      ProG NUPharose FF pre-packed columnn

      NRPB02S-Y11

      1*1mL

      1支*1ml

      NRPB02S-Y41

      4*1mL

      4支*1ml

      NRPB02S-Y15

      1*5mL

      1*5mL

      NRPB02S-Y25

      2*5mL

      2支*5mL

      填料

      重组蛋白G琼脂糖凝胶FF

      ProG NUPharose FF

      NRPB02L-10

      10mL

      1瓶*10ml

      NRPB02L-20

      20mL

      1瓶*20ml

      NRPB02L-100

      100mL

      1瓶*100ml

      NRPB02L-500

      500ml

      1瓶*500ml

      注:欧洲杯竞猜生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


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